植物體內(nèi)存在潛在抗病性，受到外界損害和病原物侵染的植物可通過(guò)激 發(fā)子和誘導(dǎo)劑（imiucer)激活植物抗病基因，使植物產(chǎn)生系統(tǒng)抗病性，以免 受到進(jìn)一步的傷害，這一現(xiàn)象己在許多研究中得到證實(shí)。其中，寡聚糖作為 —種新型生物誘抗劑已在許多作物上得到應(yīng)用，越來(lái)越受到人們廣泛關(guān)注。 寡聚糖種類很多，目前常見(jiàn)的有葡聚寡糖、寡聚半乳糖醛酸、幾丁質(zhì)寡糖和 殼寡糖等可激活植物的防衛(wèi)系統(tǒng)，提髙植物自身免疫力[14、

活性寡聚糖是一類由3?10個(gè)單糖組成，具有一定結(jié)構(gòu)和生物活性的聚合 體，國(guó)際上研究較多的是植物及微生物細(xì)胞壁多糖降解的寡糖片斷。越來(lái)越 多的試驗(yàn)結(jié)果表明，植物細(xì)胞壁不僅起到防御的結(jié)構(gòu)屏障作用，而且受到病 菌慼染時(shí)能起到積極防御反應(yīng)。一方面，植物細(xì)胞壁酶水解病原菌細(xì)胞壁中 的P-肽葡聚糖幾丁質(zhì)等，產(chǎn)生活性成分，誘導(dǎo)植物植保素等合成酶系基因表 達(dá)；另一方面，病菌入侵植物時(shí)，必須水解植物細(xì)胞壁的多糖，其降解產(chǎn)物 也能誘導(dǎo)植保素合成。因此，寡聚糖可有效地誘導(dǎo)植物產(chǎn)生防御反應(yīng)，激活 植物的系統(tǒng)性獲得免疫反應(yīng)。

根據(jù)這一理論，由十字花科植物致病菌野油菜黃單孢菌分泌的黃原膠的 寡糖碎片很可能擁有植物的誘抗活性。

實(shí)驗(yàn)方法：

大豆子葉法（Soybean Cotyledon Bioassay) [15】：

豆科植物在受到病原體侵染時(shí)，能通過(guò)莽草酸途徑、醋酸-丙二酸途徑或 醋酸-甲羥戊酸途徑，產(chǎn)生以異黃酮類為主的植保素，直接殺死入侵的病原體， 抑制病斑的:擴(kuò)大。在外源激發(fā)子的處理下豆科植物也能夠產(chǎn)生抗性反應(yīng)，合 成植保素。大豆子葉法就是利用激發(fā)子處理大豆子葉，然后通過(guò)測(cè)定子葉產(chǎn) 生的植保素的量，來(lái)表示激發(fā)子誘導(dǎo)植物抗性活性的方法。

大豆的培養(yǎng)：大豆種子用水洗凈后，用8%次氯酸鈉溶液滅菌20min，再 用無(wú)菌水沖洗干凈，暗光震蕩24h。次日將種子播種在鋪有蛭石的培養(yǎng)盒中， 置于培養(yǎng)箱中（光照：黑暗=16h: 8h)交替培養(yǎng)10d，待大豆長(zhǎng)出兩片真葉 后即可進(jìn)行活性測(cè)定。

活性測(cè)定方法：

剪下已經(jīng)長(zhǎng)出兩片真葉的大豆子葉，用8%次氯酸鈉溶液滅菌5min，然 后用無(wú)菌水沖洗干凈，再用濾紙吸干。在無(wú)菌條件下用刀片削去子葉外表皮 厚約1mm，直徑約6mm的傷口，用無(wú)菌水浸泡清洗，約3〇sec后取出，用 濾紙拭干后放入鋪有濕濾紙培養(yǎng)皿中，每皿放10片子葉作為一個(gè)處理。每個(gè) 樣品五個(gè)處理，每處理重復(fù)兩次，對(duì)照用水。取配置好的樣品溶液（含有 2mg/ml的鏈霉素）10W加在傷口上。處理后的子葉在25°C黑暗的溫箱中培 養(yǎng)24h,將每皿中的子葉轉(zhuǎn)移到一個(gè)盛有10ml雙蒸水的試管中，充分展蕩后 測(cè)定0D286〇 結(jié)果及討論：

黃原膠寡糖具有一定的植物誘抗活性，當(dāng)寡糖濃度為lOOOppm時(shí)達(dá)最高 值0J3,與對(duì)照相比具有顯著性的差異。低劑量時(shí)殼寡糖的植物誘抗活性要 略髙于黃原膠寡糖（見(jiàn)圖4-9, 4-10)。