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纖維素含量測定方法

發(fā)布日期:2015-10-28 18:04:31
  纖維素由野葡萄糖基組成,它是組成動物細(xì)胞壁的根本因素。其含量的多少聯(lián)系到動物 的機器機構(gòu)能否興旺,農(nóng)作物抗倒懸、抗毀蟲災(zāi)的威力能否較強,況且反應(yīng)到食糧農(nóng)作物、纖維農(nóng)作物和蔬菜農(nóng)作物等的產(chǎn)量和質(zhì)量。
  正在各族食糧中纖維素的含量各沒有相反,與籽粒皮膚厚薄成反比。同種食糧中,原糧纖維素  維素含量最高,加工粗加工精密度越高,纖維素含呈越少,如麥子規(guī)范粉約O.7%。稻谷約9.0%,糙米約1.0%,白米約0 4%。因而,依據(jù)纖維素的含量的測定,能夠判斷籽粒皮膚的厚薄,食糧加工精密度上下和養(yǎng)分價格評價。
纖維素含量測定方法
  纖維素的測定方法有酸堿醇醚法、堿性洗濯劑法、碘量法及比色法。第一度是國標(biāo)法,但比擬煩瑣,后者操作比擬容易。 一、方法原理纖維素是由野葡萄糖基組成的多糖,正在堿性環(huán)境下加熱使其電離成野葡萄糖。而后正在濃硫酸作用下,使單糖脫發(fā)生成糠醛類復(fù)合物。應(yīng)用蒽酮試藥與糠醛類復(fù)合物的藍綠色反響即可停止比色測定。  二、儀表和試藥.次要儀表 候溫水浴、冰罐、電爐、玻璃坩堝、漏子、定計鐘、分光光度計等。      2.試 劑 60% H2SO4濾液、濃H2SO4。
 ?。ポ焱囁帲?g蒽酮溶化于100rnl醋酸乙酯中,貯置于棕色試藥瓶中。
  纖維素規(guī)范液:精確稱取100mg純纖維素,放入100Inl量瓶中,將量瓶放入冰浴中,而后加冷的60%H2SO4 60— 70ml,正在冷的環(huán)境下食積解決 20—30min,而后用60%H2SO4濃縮至刻度,搖勻。汲取此液5.0ml放入另一50ml量瓶中,將量瓶放入冰浴中,加醇化水濃縮刻度,則每毫升含100μg纖維素。  三、操作方法.制圖纖維素規(guī)范直線
 ?。?)取6支小滴管,辨別放入0、 0.40、0.80、1.20、1.60、2.00ml纖維素規(guī)范液。而后辨別退出2.00、1.60、1.20、0.80、 0.40、0ml醇化,搖勻。則每管順次含纖維素0、40、 80、120、160、200μg。
 ?。?)向每管加0.5ml% 蒽酮試藥,再沿管壁加5.0ml濃H2SO4,塞上塞子,輕輕撼動,驅(qū)使醋酸乙酯電離,當(dāng)管內(nèi)涌現(xiàn)蒽酮絮狀物時,再猛烈撼動推進蒽酮溶化,而后即時放入沸水浴中加熱10min ,存入結(jié)冰。
 ?。?)正在分光光度計上620urn跨度下比色,測出各管消光值 。
 ?。?)以所測得的消光值為縱坐標(biāo),以纖維素含量為橫坐標(biāo),制圖纖維素規(guī)范直線。      2.樣品的測定(1)精確稱取風(fēng)干的樣品100mg,放入100rnl量瓶中,將量瓶放入冰浴中,加冷的60%H2SO4。60—70ml,正在冷的環(huán)境下食積解決半時辰,而后用60%H2SO4。濃縮至刻度,搖勻,用玻璃坩堝漏子過濾。
 ?。?)汲取上述溶液5.0ml,放入5ml量瓶中,將量瓶置于冰浴中,加醇化水釋至刻度,搖勻。       (3)汲取上液2.0ml,加0.5ml 2% 蒽酮試藥,再沿管壁加5.0ml濃 H2SO4 ,蓋上塞子,當(dāng)前操作同纖維素規(guī)范液,測出樣品正在620urn跨度下的消光值。
  纖維素是動物細(xì)胞壁的次要因素之一,纖維素含量的多少,聯(lián)系到動物細(xì)胞機器機構(gòu)興旺與否。因此反應(yīng)農(nóng)作物的抗倒懸,抗毀蟲災(zāi)威力的強弱。測定食糧、蔬菜及纖維農(nóng)作物貨物中纖維素含量是鑒定其質(zhì)量是非的主要目標(biāo)。
  一、原理
  纖維素(cellulose)為β——野葡萄糖殘基組成的多糖,正在堿性環(huán)境下加熱量合成成β——野葡萄糖。β——野葡萄糖正在弱酸作用下,可脫發(fā)生成β——糠醛類復(fù)合物。β——糠醛類復(fù)合物與蒽酮脫發(fā)縮合,生成黃色的糠醛派生物。色彩的深度可直接容量測定纖維素含量。
  二。資料、儀表設(shè)施及試藥
 ?。ㄒ唬┵Y料:烘干的米、白面或者風(fēng)干的棉、麻纖維。
 ?。ǘ﹥x表設(shè)施:1. 小滴管;2. 量筒;3. 玻璃杯;4. 移液管;5. 定量瓶;6. 布氏漏子;7. 綜合天平;8. 水浴鍋;9. 電爐;10. 分光光度計。
 ?。ㄈ┰囁帲?. 60%H2SO4濾液;2. 濃H2SO4(AR);3. 2%蒽酮試藥:將2g蒽酮溶化于100ml醋酸乙酯中,貯放于棕色試藥瓶中;4. 纖維素規(guī)范液:精確稱取100mg純纖維素,放入100ml量瓶中,將量瓶放入冰浴中,而后加冷的60%H2SO460——70ml,正在冷的環(huán)境下食積解決20——30min;而后用60%H2SO4濃縮至刻度,搖勻。汲取此液5.0ml放入另一50ml量瓶中,將量瓶放入冰浴中,加醇化水濃縮至刻度,則每ml含100μg纖維素。
纖維素含量測定方法
  三。試驗方法
 ?。ㄒ唬┣鬁y纖維素規(guī)范歸隊方程
  支小滴管,辨別放入0,0.40,0.80,1.20,1.60,2.00ml纖維素規(guī)范液,而后辨別退出2.00,1.60,1.20,0.80,0.40,0ml醇化水,搖勻,則每管順次含纖維素0,40,80,120,160,200μg。
  向每管加0.5ml2%蒽酮,再沿管壁加5.0ml濃H2SO4,塞上塞子、搖勻,靜置1min。而后正在620nm下,求測沒有同含量纖維素濾液的吸光度。
  以測得的吸光度為Y值,對于應(yīng)的纖維素含量為X值,求得Y隨X而變的歸隊方程。
  (二)樣品纖維素含量的測定
  稱取風(fēng)干的草棉纖維0.2g于玻璃杯中,將玻璃杯置冷水浴中,退出60%H2SO460ml,并食積30min,而后將食積好的纖維素濾液轉(zhuǎn)入100ml定量瓶,并用60%H2SO4定容至刻度,搖勻后用布氏漏子過濾于另一玻璃杯中。
  取上述溶液5ml放入100ml定量瓶中,正在冷水浴上加醇化水濃縮至刻度,搖勻后用。
  取2中的濾液2ml于具塞滴管中,退出0.5ml 2%蒽酮試藥,并沿管壁加5ml濃H2SO4,塞上塞子,搖勻,靜置12min,而后正在620nm跨度下,求測吸光度。
  四、后果與綜合
  依據(jù)測得的吸光度按歸隊方程求出纖維素的量,而后按下式打算樣品纖維素的含量:
 ?。絏×10-6×a×
  式中:X——按歸隊方程打算出纖維素含量(μg)。W——樣品重(g)。10-6——將μg折算成g的系數(shù)。A——樣品濃縮折扣。Y——樣品中纖維素含量(%)。
  因為膳食纖維與人體衰弱的聯(lián)系日益遭到注重,急迫需求食物中膳食纖維各因素的數(shù)據(jù),這對于測定食物中膳食纖維的方法學(xué)鉆研提出了請求。小結(jié)膳食纖維綜合方法,其原理次要是根據(jù)膳食纖維可停止的化學(xué)反響和酶反響,歷史上膳食纖維綜合的主要方法囊括非酶分量法如粗纖維、中性洗濯劑纖維和堿性洗濯劑纖維的綜合方法;酶分量方法次要有AOAC需要的總纖維、可溶纖維和沒有溶纖維的測定方法;酶化學(xué)方法次要有酶顯色法、酶氣相色譜法、酶低壓液相色譜法,以及非洲呼應(yīng)組織關(guān)于膳食纖維測定的各族鉆研和使用方法。
  本國的沒有同單位依據(jù)沒有同聲代膳食纖維綜合方法的改良,公布了系萬國度規(guī)范方法。最早的規(guī)范是本國保健部1985公布GB5009. 10-85(藥品中粗纖維的測方法),該方法原理是正在硫酸作用下,樣品中的糖、小粉、果膠質(zhì)和半纖維素經(jīng)水消除去后,再用堿解決,除了蛋白胨及脂膏酸,存在的殘渣為粗纖維。如內(nèi)中含有沒有溶于酸堿的雜質(zhì),可灰化后除了。該規(guī)范用來動物類藥品中粗纖維含的測定。以該綜合方法為根底,國度規(guī)范局1985年公布了GB5515-85食糧、油料測驗一粗纖維素測定法,用來指點貨物食糧中粗纖維素的測定。生意部1987年出面了GB8310-87茶粗纖維測定,用來茶葉中粗纖維含的測定。1989年出面GB10469-89水果、蔬菜粗纖維的測定方法,用來水果、蔬菜貨物粗纖維含量的測定。
  粗纖維測定法是Einhof正在1801-1809年構(gòu)建的,別稱食積方法。內(nèi)中的木質(zhì)素正在堿食積進程中少量溶化,半纖維素正在酸、堿食積進程中均少量溶化。該法可回收5096-80%的纖維素,20%的半纖維素,1096-50%的木質(zhì)素。該方法沒有能徹底回收任何化學(xué)因素。
  GB9822-88(谷物沒有溶性膳食纖維測定法)是生意部1988年同意的用來谷物沒有溶性膳食纖維的測定,該方法原理是谷物樣品經(jīng)中性洗濯劑濾液浸煮,殘渣用熱水充足洗濯后,退出a一小粉酶濾液以合成殘留的聯(lián)合態(tài)小粉,再用電、鹽酸安非拉酮洗濯,烘干即得沒有溶性膳食纖維。GB12394-90(藥品中沒有溶性膳食纖維的測定方法),保健部1990年公布,是本國眼前廣泛運用的方法。該規(guī)范規(guī)則了食物中沒有溶性膳食纖維的中性洗濯劑測定方法,實用于各類動物性食物和含有動物性食物的混合食物中沒有溶性膳食纖維的測定,其最小檢出限為O.lmg.該方法原理是正在中性洗濯劑(次要因素一般是十二氫氧基硫酸鈉)的食積作用,樣品中的糖、小粉、蛋白胨、果膠等精神被溶消除去,沒有能食積的殘渣為沒有溶性膳食纖維,次要囊括纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、角質(zhì)和二氧化硅等,并囊括沒有溶性灰分。該法測得的纖維稱為中性洗濯劑纖維。若采納堿性洗濯劑(次要因素是十六烷三甲基澳化按)對于樣品停止食積,則測得的纖維稱為堿性洗濯劑纖維。中性洗濯纖維素是對于總的動物細(xì)胞壁含量的約莫,次要囊括纖維素、半纖維素和木質(zhì)素。堿性洗濯纖維是對于纖維素和木質(zhì)素含量的約莫,依據(jù)二者的差值可測評糧草中半纖維素含。粗纖維中纖維素、半纖維素和木質(zhì)素的對比罕用于指點豬糧草原料藥的配制。
纖維素含量測定方法
  與粗纖維測定法相比,洗濯劑測定法能夠回收全副的纖維素、沒有可溶性半纖維素、木質(zhì)素。但洗濯劑法只能測定沒有可溶性膳食纖維,沒有能測定可溶性膳食纖維。隨著對于膳食纖維鉆研的晉級,以及越來越多的膳食纖維種類的涌現(xiàn),之上保守的非酶一分量法已體現(xiàn)出顯然的有余。
  酶一分量法是20百年$0時代停滯興起的,現(xiàn)已變化AOAC肯定的方法。它是模仿膳食纖維正在人消化道里停止的自然化學(xué)反響停止檢測。該法可綜合藥品中的總膳食纖維(DF)、可溶性膳食纖維(SDF)和沒有溶膳食纖維(IDF)。其綜合原理是辨別用熱穩(wěn)固的a一小粉酶、卵白酶、野葡萄糖昔酶停止酶解食積樣品以去除蛋白胨和小粉。DF的測定是先酶解,而后用乙醉積淀,將杞人憂天的DF殘渣用乙醉和鹽酸安非拉酮顯影,枯燥后稱重。IDF和SDF是正在樣品酶解后立刻將IDF過濾,過漣后的殘渣用熱水顯影,經(jīng)枯燥后稱重。SDF是將上述濾出液用乙醉積淀,將濾渣千燥、稱重。最初DF, IDF和SDF的含經(jīng)過蛋白胨和灰分含停止校對于。
  該方法適于正常食物如谷類、蔬菜等和衛(wèi)生藥品的測定。是眼前國內(nèi)上使用最寬泛的方法。然而該法測定總膳食纖維是依據(jù)膳食纖維沒有溶于酶解液,從4倍容積的9596乙醉混合液結(jié)合進去的,一些可溶性膳食纖維(集合度DP正在3-12)如菊糖、聚野葡萄糖、抗性糊精、抗性寡糖等低成員量膳食纖維可全體或者全副溶化正在?8%的乙醉濾液里,沒有能用該法測出,那樣就招致后果偏偏低。
  酶化學(xué)法也是AOAC肯定的膳食纖維綜合方法,本國對于該方法的鉆研還很無限,該方法是從化學(xué)綜合動手,經(jīng)過測定每一詳細(xì)組成因素的含量得其總S o此方法可測定總膳食纖維、中性糖、糖醛酸的殘留全體以及木質(zhì)素。此方法系用酶解方法將小粉去除,而后用乙醉使可溶性的多聚容積淀進去,再用硫酸電離此積淀物中的沒有可溶多糖使內(nèi)中的中性糖開釋進去。此中性糖由氣相色譜定綜合。堿性電離液中的糖醛酸用比色法容量檢測,木質(zhì)素則用重法測定。最初中性糖+糖醛酸+木質(zhì)素二DF.該方法可容量測定內(nèi)中每一種中性糖和總的堿性精神(糖醛酸),還可共同測定木質(zhì)素,但因受儀表設(shè)施限制,因此沒有實用于通例的膳食纖維綜合。
  儀表法是最近多少年崛起的方法,次要是經(jīng)過粗纖維測定儀停止測定。CXC系列粗纖維測定儀是根據(jù)眼前罕用的酸堿消煮法消煮樣品,并停止分量測定來失去試樣的粗纖維含量的儀表。粗纖維測定儀采納深淺精確的酸和堿,正在一定環(huán)境下消煮樣品,再用酒精除了可溶精神,經(jīng)低溫灼燒后扣除礦精神的量,所含量稱粗纖維。它沒有是一度確實的化學(xué)實業(yè),但是正在公認(rèn)強迫規(guī)則的環(huán)境下測出的概況成分,內(nèi)中以纖維素為主,再有大批半纖維素和木質(zhì)素。
  總之,之上膳食纖維綜合方法都有各自的優(yōu)缺欠,用目后任何一種膳食纖維測定方法均沒有能測定藥品中的一切膳食纖維含量。